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产品简介
KO52人白血病细胞是源自CD7⁺混合表型急性白血病的模型,携带TP53 R248W和NRAS G13R关键突变,同时表达髓系与T细胞标志物,具有伊马-ti-尼耐药特性及单核/粒细胞双向分化潜能,适用于混合表型白血病机制、耐药研究及诱导分化治疗探索。
KO52人白血病细胞产品介绍
产品编号: HY-A104 | 生物安全等级: BSL-1 | 储存条件: 液氮长期保存
一、产品概述
KO52细胞是源自CD7⁺混合表型急性白血病的珍-xi-体外模型,分离自46岁男性患者骨髓。该细胞系同时表达髓系标志物(CD13、CD33)和T细胞相关抗原(CD2、CD5、CD7),携带TP53 R248W突变(伴17p缺失)和NRAS G13R突变,是研究混合表型白血病发病机制、治疗耐药及细胞分化可塑性的独特工具。KO52细胞对阿糖胞苷中度敏感、对伊马ti-尼耐药,为白血病耐药机制研究提供了理想的体外平台。

图1:KO52细胞相差显微镜图像(左:×10;右:×20),显示小型淋巴细胞样形态,悬浮生长,细胞呈圆形、边界清晰
二、细胞生物学特性
2.1 基本特征

2.2 免疫表型特征
KO52细胞具有独特的混合表型,同时表达:
髓系标志物:CD13、CD33
T细胞相关抗原:CD2、CD5、CD7
HLA-DR:阳性表达
这种髓系与淋系标志物共表达的特征,使其成为研究白血病细胞谱系可塑性、转分化机制及免疫表型异质性的珍贵模型。
2.3 遗传学特征


图2:混合表型急性白血病骨髓涂片(瑞氏染色),显示原始细胞形态异质性,兼具髓系和淋系分化特征
三、培养条件与操作指南
3.1 推荐培养体系
基础培养基:α MEM
血清添加:5%优质胎牛血清(FBS)
培养环境:37℃,5% CO₂,饱和湿度
低血清培养:KO52细胞采用5% FBS低血清培养体系,与常规白血病细胞系(10-20% FBS)不同,需注意血清浓度控制。
3.2 传代与冻存
传代操作要点: 当细胞密度增加、培养基颜色变黄或细胞聚集成团增多时进行传代。将细胞悬液轻柔吹打均匀(以分散大团块),转移至离心管。200-300×g离心5分钟,小心吸弃上清。用新鲜预热的培养基重悬细胞,按1:3至1:5比例接种到新培养瓶。通常每2-3天传代一次。
冻存方案: 采用标准程序降温法,细胞密度控制在1×10⁶-5×10⁶ cells/mL,使用含10% DMSO的冻存保护液。程序降温后转移至液氮(-196℃)长期保存。

图3:KO52细胞荧光显微镜图像,显示细胞核形态均一,细胞增殖活跃
四、应用领域
4.1 混合表型白血病研究
1. 发病机制研究:CD7⁺混合表型急性白血病的细胞和分子过程
2. 谱系可塑性:髓系与淋系标志物共表达的调控机制
3. 免疫表型异质性:白血病干细胞表型特征与临床预后关系
4.2 耐药机制研究
1. TP53突变相关耐药:p53通路失活与-hua-疗抵抗机制
2. NRAS突变信号:RAS-RAF-MEK-ERK通路激活与靶向治疗耐药
3. 伊马-ti-尼耐药:非BCR-ABL1依赖的luo氨酸激酶抑制剂耐药机制
4. 多药耐药基因:MDR1表达调控与药物外排机制
4.3 细胞分化研究
KO52细胞具有双向分化潜能:
单核细胞系分化:PMA/1,25(OH)₂D₃诱导
粒细胞系分化:G-CSF诱导
可用于研究白血病细胞分化阻滞机制及诱导分化治疗策略。
4.4 药物筛选与靶点发现
1. 抗体药物筛选:CD7、CD33等靶点的抗体药物活性评价
2. 化学药物毒性:新型抗白血病药物的细胞毒性效应评估
3. 信号通路抑制剂:RAS、TP53通路靶向药物筛选
4. 靶点识别:通过关键信号因子鉴定,寻找急慢性髓系白血病新治疗靶点
4.5 疾病进展模型
利用其体内致瘤性,构建免疫缺陷小鼠白血病模型,研究疾病进展、转移机制及体内药效评价。
五、质量控制与鉴定
为确保实验数据的可靠性和可重复性,建议用户定期进行以下质量控制:
STR鉴定:每6-12个月进行一次短串联重复序列(STR)分析,确认细胞身份
支原体检测:定期使用PCR法检测支原体污染
免疫表型验证:流式细胞术检测CD13、CD33、CD7、CD2、CD5、HLA-DR表达
突变检测:PCR或测序验证TP53 R248W和NRAS G13R突变状态
代次控制:建议使用低代次细胞进行实验
六、产品优势
1. 独特疾病模型:源自罕见的CD7⁺混合表型急性白血病,同时表达髓系和淋系标志物,模型稀缺独特
2. 临床相关突变:携带TP53和NRAS两种在白血病中常见且与预后不良相关的关键突变,临床转化价值高
3. 功能多样性:兼具分化潜能、药物耐药性和体内致瘤性,满足多维度研究需求
4. 耐药研究利器:固有的伊马-ti-尼耐药性,是研究luo-氨酸激酶抑制剂耐药机制的理想工具
5. 分化可塑性:可诱导分化为单核或粒细胞系,为分化治疗研究提供平台
七、注意事项
仅供科研使用,不得用于临床诊断或治疗
低血清培养:必须使用5% FBS,高血清可能抑制细胞增殖
轻柔操作:吹打细胞时动作轻柔,避免机械损伤
及时传代:避免细胞过度密集或营养耗尽,通常每2-3天传代一次
团块分散:传代时需充分吹打分散细胞团块,保证单细胞悬液状态
定期观察:显微镜下观察细胞形态、密度和聚集情况,及时记录细胞状态
所有操作需在符合生物安全等级要求的实验室内进行
严格遵循无菌操作规范,避免交叉污染
供应商信息: 西安禾洋生物科技有限公司(CellFactory)
技术支持: 提供完整的KO52人白血病细胞培养方案、流式免疫表型检测指导及突变检测技术支持
货期: 现货供应,干冰运输
规格: 1支冻存管(1×10⁶ cells/vial)
保藏中心: JCRB0123
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