产品简介

Caco-2人结肠癌细胞是源自结直肠腺癌的经典体外模型，具有自发分化为肠上皮样细胞的独特能力，可形成紧密连接单层并表达药物转运蛋白，是FDA认可的口服药物吸收预测金标准，广泛应用于药物转运机制、肠道屏障功能及营养物质吸收研究。

Caco-2人结肠癌细胞产品介绍

产品编号： HY-A092 | 生物安全等级： BSL-1 | 储存条件： 液氮长期保存

一、产品概述

Caco-2细胞是药物吸收研究和肠道生物学领域的金标准体外模型，源自72岁男性结直肠腺癌患者。该细胞系在体外培养过程中可自发分化为具有肠上皮细胞特征的单层细胞，表达典型的肠道刷状缘酶、紧密连接蛋白及药物转运蛋白，被广泛认可为预测口服药物生物利用度的模型，也是研究肠道屏障功能、营养物质吸收机制及肠毒性的理想工具。

图1：Caco-2细胞相差显微镜图像（左：低密度；右：高密度），显示典型上皮样形态，细胞贴壁生长，高密度时形成紧密连接的单层结构。

二、细胞生物学特性

2.1 基本特征

2.2 功能特性

Caco-2细胞具有独特的肠道上皮分化能力：

刷状缘酶表达：碱性磷酸酶、蔗糖酶-异麦芽糖酶等

紧密连接形成：表达ZO-1、Occludin等紧密连接蛋白，形成极性单层

药物转运蛋白：表达P-糖蛋白（P-gp）、BCRP等外排转运体

营养转运体：表达PEPT1肽转运体、葡萄糖转运体等

受体表达：热稳定肠毒素（Sta, E. coli）受体、表皮生长因子（EGF）受体

结合蛋白：维甲酸结合蛋白I和II（CRBP I/II）

这些特性使Caco-2细胞成为模拟人体小肠上皮屏障功能的体外模型。

图2：Caco-2细胞相差显微镜图像（100μm标尺），显示细胞呈多边形上皮样，细胞间形成紧密连接，可见刷状缘样结构。

三、培养条件与操作指南

3.1 推荐培养体系

基础培养基：MEM（含NEAA，非必需氨基酸）

血清添加：20%优质胎牛血清（FBS）

抗生素：1%青-mei-素-链-mei-素（P/S）

专用培养基：Caco-2细胞专用培养基（货号：HY-CSC-173）

培养环境：37℃，5% CO₂，饱和湿度

高血清需求：Caco-2细胞需要20% FBS以维持良好增殖和分化状态，不可降低血清浓度。

3.2 传代与冻存

传代操作要点： 当细胞密度达到80%时进行传代（不可过度生长）。使用0.25%胰-dan-白酶-EDTA消化液，根据培养时间调整消化时间（3-10分钟）。传代时需充分吹散细胞，避免细胞团块影响贴壁。按1:3至1:6比例接种。

冻存方案： 采用无血清非程序冻存液或通用血清型程序冻存液，细胞密度控制在1×10⁶-5×10⁶ cells/mL。程序降温后转移至液氮（-196℃）长期保存。

图3：Caco-2细胞形成紧密单层结构（相差显微镜），显示典型的"铺路石"样形态，细胞间连接紧密。

四、应用领域

4.1 药物研发（核心应用）

1. 口服药物吸收预测：FDA推荐的体外渗透性筛选模型，用于BCS分类

2. 药物转运机制研究：P-糖蛋白介导的外排、主动转运与被动扩散机制

3. 药物-药物相互作用：评价药物对转运体的抑制或诱导作用

4. 前药设计评价：评估前药在肠道上皮的代谢转化

4.2 肠道生物学研究

1. 肠道屏障功能：紧密连接通透性、炎症对屏障的影响

2. 营养物质吸收：葡萄糖、氨基酸、肽类、脂肪酸等吸收机制

3. 肠道分化机制：肠上皮细胞分化、极性建立及微绒毛形成

4.3 毒理学与安全性评价

1. 肠毒性评价：药物、食品添加剂、环境污染物对肠道上皮的损伤

2. 纳米药物安全性：纳米载体对肠道屏障的穿透与影响

3. 益生菌作用机制：益生菌与肠道上皮相互作用研究

五、质量控制与鉴定

为确保实验数据的可靠性和可重复性，建议用户定期进行以下质量控制：

STR鉴定：提供完整STR分型报告，确认细胞身份

支原体检测：阴性

细胞活性：复苏后活性＞90%

代次控制：建议使用10代以内细胞进行实验

分化验证：检测碱性磷酸酶活性或TEER值（跨上皮电阻）确认屏障功能

六、产品优势

1. 金标准模型：FDA认可的口服药物吸收预测体外模型，国际法规广泛接受

2. 自发分化能力：无需特殊诱导即可分化为功能性肠上皮样细胞

3. 功能完整性：表达完整的药物转运蛋白、代谢酶及紧密连接蛋白

4. 应用广泛：涵盖药物研发、营养学、毒理学等多个研究领域

5. 质控严格：提供完整STR鉴定报告，支原体检测阴性，代次可控

七、注意事项

仅供科研使用，不得用于临床诊断或治疗

贴壁较慢：细胞复苏后需2-3天-wan-全贴壁，初期勿频繁观察

充分吹散：传代时必须充分吹散细胞，团块细胞影响贴壁和实验结果

及时传代：长至80%即需传代，过度生长影响细胞状态和分化能力

消化调整：培养时间越长消化难度越大，需根据密度调整消化时间（3-10分钟）

消化终点：大部分细胞滑落即可终止消化，避免过度消化损伤细胞

片状生长：细胞成片状生长，密度大时表面空泡黑点增多属正常现象

所有操作需在符合生物安全等级要求的实验室内进行

严格遵循无菌操作规范，避免交叉污染

供应商信息： 西安禾洋生物科技有限公司（CellFactory）

技术支持： 提供完整的Caco-2人结肠癌细胞培养方案及实验技术支持

货期： 现货供应，T25培养瓶（常温）或冻存管（干冰）运输可选

规格： 1×10⁶ cells/T25培养瓶或1mL冻存管×2支

保藏机构： ATCC HTB-37；BCRJ 0059；DSMZ ACC-169；ECACC 86010202