产品简介

NIH-3T3小鼠胚胎成纤维细胞是源自NIH Swiss小鼠胚胎的经典成纤维细胞系，具有高度自发转化敏感性及接触抑制缺失特性，对肉瘤病毒病灶形成高度敏感并支持逆转录病毒增殖，适用于细胞转化、癌基因功能及DNA转染研究。

NIH-3T3小鼠胚胎成纤维细胞产品介绍

产品编号： HY-C027 | 生物安全等级： BSL-1 | 储存条件： 液氮长期保存

一、产品概述

NIH-3T3细胞是细胞生物学和分子生物学研究领域的小鼠成纤维细胞系，源自NIH Swiss小鼠胚胎。该细胞系具有高度的自发转化敏感性和接触抑制缺失特性，对肉瘤病毒病灶形成高度敏感，支持多种逆转录病毒（包括白血病病毒）的增殖，是研究细胞转化、癌基因功能、DNA转染及病毒学的理想工具。NIH-3T3细胞具有典型的成纤维细胞形态，贴壁生长，培养简便，为肿瘤生物学、分子遗传学和药物筛选研究提供了可靠的体外平台。

图1：NIH-3T3细胞相差显微镜图像（ATCC CRL-1658），左：低密度，右：高密度（100μm标尺），显示典型成纤维细胞样形态，细胞呈梭形，贴壁生长，呈漩涡状或平行排列。

二、细胞生物学特性

2.1 基本特征

2.2 遗传与功能特性

图2：NIH-3T3细胞相差显微镜图像，显示典型成纤维细胞形态，细胞呈梭形伸展，胞质丰富，细胞核椭圆形，可见细胞漩涡状排列。

三、培养条件与操作指南

3.1 推荐培养体系

基础培养基：DMEM + 10%胎牛血清（FBS）

培养环境：37℃，5% CO₂，饱和湿度

3.2 传代与冻存

传代操作要点： 当细胞密度达80%-90%时进行传代。使用0.25%胰dan白酶-EDTA消化液：

吸去旧培养基，PBS轻柔洗涤1-2次

加入0.25%胰dan白酶-EDTA，37℃孵育2-3分钟

显微镜下观察细胞变圆、间隙增大时，加入含血清培养基终止消化

轻柔吹打收集细胞，按1:3至1:6比例传代

冻存方案： 使用冻存液（90% FBS + 10% DMSO），细胞密度调整为1-5×10⁶ cells/mL。程序降温后转移至液氮（-196℃）长期保存。

图3：小鼠胚胎成纤维细胞相差显微镜图像，显示细胞呈典型梭形成纤维细胞形态，细胞排列呈漩涡状或平行束状。

四、应用领域

4.1 细胞转化研究

癌基因功能：Ras、Myc、Src等癌基因转化活性验证

抑癌基因：p53、Rb等抑癌基因功能研究

转化机制：细胞恶性转化的分子机制

肿瘤抑制：肿瘤抑制因子的鉴定与功能分析

4.2 病毒学研究

肉瘤病毒：MSV（Moloney肉瘤病毒）病灶形成实验

逆转录病毒：白血病病毒复制、包装细胞系构建

病毒致癌：病毒介导的细胞转化机制

基因治疗：逆转录病毒载体包装、转导效率评估

4.3 分子生物学研究

DNA转染：质粒DNA转染效率优化

基因表达：外源基因表达、启动子活性分析

信号通路：生长因子信号、细胞周期调控

基因编辑：CRISPR/Cas9基因敲除/敲入

4.4 药物研发

抗肿瘤药物筛选：细胞转化抑制、细胞增殖抑制

生长因子研究：EGF、PDGF、FGF等生长因子活性

细胞毒性评估：化合物细胞毒性、安全性评价

放射敏感性：放she治疗敏感性机制

4.5 细胞生物学研究

细胞周期：接触抑制、细胞周期调控机制

细胞衰老：衰老相关机制、抗衰老研究

细胞黏附：细胞外基质相互作用

细胞迁移：划痕实验、Transwell迁移实验

五、质量控制与鉴定

为确保实验数据的可靠性和可重复性，建议用户定期进行以下质量控制：

种属鉴定：确认小鼠来源，排除人源细胞污染

支原体检测：定期使用PCR法检测支原体污染，确保阴性

形态学监测：保持典型成纤维细胞形态，梭形伸展

转化敏感性：MSV病灶形成实验验证转化敏感性

代次控制：建议使用低代次细胞进行实验

六、产品优势

经典成纤维细胞模型：细胞转化和基因转染研究金标准

高度转化敏感：对癌基因和肿瘤病毒高度敏感，适合转化研究

病毒支持能力：支持多种逆转录病毒增殖，适合病毒学研究

培养简便：贴壁生长，培养条件简单，易于维护

应用广泛：涵盖肿瘤生物学、分子生物学、病毒学、药物筛选等多领域

质控严格：种属鉴定正确，支原体检测阴性，确保细胞质量

七、注意事项

仅供科研使用，不得用于临床诊断或治疗

接触抑制缺失：细胞失去正常接触抑制，可过度生长，需及时传代

转化敏感性：细胞具有高度自发转化倾向，注意代次控制

消化控制：胰dan白酶消化时间不宜过长，避免细胞损伤

密度维持：保持适宜细胞密度，避免过度密集或稀疏

无菌操作：所有操作在生物安全台内进行，严格无菌操作

建议建立细胞使用记录，追踪细胞代次和培养历史

供应商信息： 西安禾洋生物科技有限公司（CellFactory）
技术支持： 提供完整的NIH-3T3小鼠胚胎成纤维细胞培养方案及技术支持
货期： 现货供应，T25培养瓶（常温）或冻存管（干冰）运输可选
规格： 1×10⁶ cells/T25培养瓶或1mL冻存管